מהו מחקר בקטריולוגי? לפי איזו תכנית היא מתבצעת? מה הכוונה בבטיחות במקרה זה? מהן המטרות והשלבים של מחקר בקטריולוגי?
מידע כללי
בדיקה בקטריולוגית היא תהליך מדעי שבו מזהים חיידקים וחוקרים את תכונותיהם על מנת לבצע אבחנה מיקרוביולוגית. חשיבות רבה כאן היא קביעת הסוג או המין של המיקרואורגניזם המתקבל (תרבית טהורה משתמעת). זה מלווה בחקר התכונות הביוכימיות והפיזיולוגיות של אורגניזמים, כמו גם הנטייה להיווצרות רעלנים. למטרות אלה משתמשים בתגובות משקעים ואגלוטינציה. נהוג גם להדביק חיות מעבדה עם זיהוי לאחר מכן של שינויים פתולוגיים.
עבודה עם חומר בדיקה
אלגוריתם המחקר הבקטריולוגי מספק הקפדה על הנחיות מיוחדות. לפיכך, יש לאסוף את חומר הבדיקה בכלים סטריליים בתנאים אספטיים. יש צורך גם לטפלכדי להבטיח משלוח למעבדה בהקדם האפשרי. רצוי לשמור דגימות בקור. הטכניקה של מחקר בקטריולוגי מספקת מצבים אפשריים רבים. לפיכך, סוג האובייקט, תכונות המיקרואורגניזם ואופי המחלה מחייבים לעתים קרובות לפתח הוראות פרטניות לעבודה. מספר רב של שיטות שונות משמשות בעבודה. אחד הנפוצים ביותר הוא בקטריוסקופיה. אבל אם החיידקים אינם מקובעים, אז משתמשים בטיפה מרוסקת או תלויה. יש לציין ששתי האפשרויות האחרונות מאופיינות ברמת מדבקות מוגברת.
בקטריוסקופיה
במקרה זה, נעשה שימוש במשיכות. כדי ליצור אותם, אתה צריך לפזר טיפה מהנוזל הנחקר על פני משטח של שקף זכוכית. Zates צריך לייבש אותו. זה נעשה לרוב על ידי העברת התרופה דרך להבה המתקבלת ממבער גז. למרות שניתן להשתמש בתרכובות קיבוע כחלופה. כדי לציין שבוצעו פעולות הכנה עם תכשיר זה, הוא מוכתם. מטרת מניפולציה כזו היא דיוק, וזה חשוב מאוד כאשר מתבצעת בדיקה מיקרוסקופית ובקטריולוגית. אחרי הכל, אם אתה עושה שימוש חוזר בתרופה למטרה אחרת, אתה מקבל דייסה, שיהיה קשה מאוד לעבוד איתה בצורה יעילה.
למה בקטריוסקופיה כל כך פופולרי
לא מעט בשל הזמינות של שיטה זו. אם מתבצע מחקר בקטריולוגי של תכשיר טרי, אז כדי לקבוע את הפתוגןניתן להשתמש בתגובות מיקרוכימיות או צביעה סלקטיבית של חלקים מבניים שונים של המיקרואורגניזם. איזה יותר טוב? ניתן לקבל תוצאה מדויקת יותר בעבודה עם תכשיר צבעוני. במקרה זה, חומר הבדיקה מוחל על שקופית זכוכית שהוכנה מראש. והקפידו לדלל (ואם אפשר אפילו) שכבה. לאחר מכן, עליך לחכות עד שהתרופה תתייבש באוויר. לאחר מכן מקבעים את המיקרואורגניזמים באחת מהשיטות המקובלות. לאחר מכן, התכשיר המקורר נתון להכתמה עם צבע דיפרנציאלי או פשוט. לשם כך, ניתן להשתמש בתכשירים יבשים וילידיים. לאחר מכן, נותר להפנות קרניים אולטרה סגולות או כחולות קצרות למקום הצטברות האורגניזמים, מה שגורם לחיידק כולו או לחלקים מסוימים בגופו להאיר.
יישום מעשי של בקטריוסקופיה
הוא משמש לאבחון מספר מחלות זיהומיות. המפורסמים שבהם הם שחפת, זיבה וחום חוזר. בנוסף, הם פונים למחקר על מנת לחקור את כל מכלול המיקרופלורה של איבר או מוצר. אבל מבקרים מצביעים לעתים קרובות על חוסר האמינות והדיוק היחסיים של שיטה זו.
גידולים ותת-תרבויות של תרביות חיידקים
בצע אותם באמצעות פיפטת פסטר. ביצוע בדיקה בקטריולוגית וציטולוגית לרוב קשה לביצוע ללא חיסון ותת-תרבות במהלך זרימת העבודה. כשעובדים עם פיפטת פסטר, הקצה שלהלהתנתק בפינצטה. הכלי עצמו נישא לאחר מכן דרך להבת המבער ולאחר מכן נותן לו להתקרר. אגב, לזריעה ניתן להשתמש באמצעי תזונה נוזליים ומוצקים כאחד. הבחירה מושפעת מאילו מטרות של מחקר בקטריולוגי נרדפים. יחד עם זאת, יש צורך לדבוק באלגוריתם של עבודה ובטיחות. לכן, כאשר עובדים עם תווך תזונתי נוזלי, יש צורך לוודא שהוא לא נשפך החוצה ולא ירטיב את הקצוות של הפקק והמבחנות. כאשר המחקר מתבצע עם חומר מוצק, לעתים קרובות משתמשים במחט מיוחדת כדי להיכנס לתרבות. כאשר מבצעים זריעה וזריעה מחדש, הם צריכים להתבצע ליד להבת מבער גז. למען טוהר הניסוי, המבחנה לא צריכה להישאר פתוחה לאורך זמן. לגבי הכלי עם תרבות: כדאי לוודא שהוא לא נוגע בכלום. כמו כן, הטכניקה של מחקר בקטריולוגי מספקת שריפת קצוות המבחנה לפני סגירתה. יש לחתום על מוצר מוגמר מיד לאחר הייצור כדי למנוע בלבול עתידי.
יעילות זריעה
מאמינים ששיטה זו מאפשרת קבלת נתונים מדויקים ומהימנים יותר במהלך האבחון בקטריולוגי מאשר בקטריוסקופיה שנחשבה בעבר. במקרה זה, אלגוריתם הפעולות הוא כדלקמן:
- בתחילה, תרבית טהורה נמרחת על פני המצע התזונתי, אשר יוצקים לצלחת פטרי.
- זריעה ראשונית צריכה להיעשות בתנאים נוחים למיןמיקרואורגניזמים.
- לאחר יום או יומיים, בנוכחות סביבה אופטימלית, כל המושבות המתאימות עוברות למקום שבו הן יכולות להתפתח למקסימום. זה משחרר אותם, לפיכך, ממיקרופלורה חיצונית.
התוצאה הסופית היא תרבית של חיידקים הומוגניים שניתן לזהות.
תרבויות טהורות
אבל איך הם עשויים? לשם כך, נעשה שימוש בשיטות ביולוגיות ומכניות. במקרה הראשון, מדיה תזונתית ממלאת תפקיד גדול, שבה יש תנאים הכרחיים נוחים לפיתוח תרבות מסוימת. ניתן להשתמש בגישה גם כאשר חיות מעבדה הרגישות לסוג מסוים של חיידקים נדבקות. שיטות מכניות מתבססות על שימוש במכשיר סטרילי, שבעזרתו מכניסים את התרבית לתווך מזין הממוקם בצלחות הפטרי הראשונה, השנייה והשלישית. אז יש להמתין עד שיגדלו מושבות בודדות, וכבר תבלוט מהן תרבות טהורה. ניתן לגדל חיידקים גם בתרמוסטטים מיוחדים, שבהם הטמפרטורה נשמרת ברמה מסוימת (בדרך כלל כ-37 מעלות). במקרה זה, התהליך נמשך כיום. אבל, בהתאם לסוג המיקרואורגניזמים, יתכנו מונחים אחרים. חשובה גם נוכחות הריכוז הנדרש של חמצן. לשם כך, השתמש בשיטות שונות של אוורור. עד כה, דיברנו על המצב בכללותו ובכלל, אבל עכשיו בואו נמקד את תשומת הלב שלנו במה היא סכמת המחקר הבקטריולוגי.
תאמן
קבוצה של שיטות משמשת לעתים קרובות כדי לזהות מיקרואורגניזמים פתוגניים בגוף של חולה או נשא פוטנציאלי. החומרים והשיטות בהם נעשה שימוש תלויים במטרות הניתוח, וכן בתנאי הסביבה בה מתבצעת העבודה. בפועל, לרוב חיידקים מתגלים באמצעות תרביות דם הנלקחות מאדם או חיה. אם הנגעים המקומיים מוגדרים היטב, ניתן לחפש פתוגנים באזורים בעייתיים. זה אופייני למחלות כמו דיזנטריה, זיבה, דיפטריה ועוד מספר דברים דומים. במקרים חמורים במיוחד, תהליך זה מחולק לשלבים נפרדים של בדיקה בקטריולוגית (האופיינית לקדחת טיפוס). כל אחד מהם משתמש בשיטות משלו, שמטרתן למצוא את הגורם לזיהום. בואו נסתכל מקרוב על המצב עם קדחת הטיפוס. בשבוע הראשון של המחלה, הדרך האמינה ביותר לאבחן את המחלה היא תרביות דם. בשני, מחקר סרולוגי נחשב ככזה. בשבוע השלישי בודקים צואה. השיטה האחרונה נחשבת לבדיקת הבראה.
זיהוי מיקרואורגניזם
זה מתחיל בתהליך צביעתו. אחר כך הם בוחנים איך החיידק יכול לפרק פחמימות, חומצות אמינו וכו'. בנוסף, ניתן להשלים תהליך זה על ידי מחקר של תכונות אחרות שיש לכל סוג או מין של מיקרואורגניזמים בודדים. כדוגמה, יש לתת את האפשרויות להמסת אריתרוציטים של בעלי חיים שונים, ההשפעה על קרישת פלזמה בדם והמסת קריש.פיברין וכן הלאה. כל זה הוא המאפיינים הדיפרנציאליים של נציגים בודדים של עולם המיקרו. כמו כן, ניתן להשתמש בזיהוי סרולוגי לצורך זיהוי סופי (אך לרוב מדובר בחיידקים פתוגניים השייכים למשפחת המעיים).
מסקנה
יש לציין שלא ניתן לזהות מספר מיקרואורגניזמים בשיטות המתוארות במאמר. במקרה זה, נעשה שימוש נרחב בפרקטיקה של הדבקת חיות מעבדה. החישוב נעשה על כך שתופיע רעילות או פתוגניות אופיינית, שאינה נצפית בתנאים מלאכותיים. זיהום יכול לשמש גם כשיטה להצטברות של חיידקים פתוגניים. וכבר כאשר משווים את מאפייני התרבות הנחקרת, המצויים בתהליך חקר תכונות ביולוגיות, מורפולוגיות, סרולוגיות וביוכימיות, ניתן לומר שידוע באיזה סוג של חיידקים אנו מתמודדים. זיהוי פירושו אינדיקציה של הסוג, המין והסוג של החיידק. אם המיקרואורגניזם הנחקר חורג בתכונות מסוימות מהמאפיין הטיפוסי שלו, יש לציין זאת. מספר מומחים מאמינים שבמקרים כאלה יהיה שימושי להזדהות מחדש עם שכפול של כל השיטות והטכניקות בהן נעשה שימוש. לפעמים ניתן לקחת את המחקר לשלב הבא, שדורש גישה רצינית יותר (ויקרה יותר). אם התקבלו תוצאות שליליות, אז זה מצביע על ההכנהמיקרואורגניזמים נעדרו או שהם לא היו ברי קיימא. אבל למען דיוק המחקר, אם יש חשד למספר נשאי בצילוס (דיזנטריה, דיפתריה, קדחת טיפוס), מוצגות בדיקות חוזרות ונשנות במקרים כאלה. זה הכרחי כדי שלמומחים יהיה מושג מדויק עם מה הם צריכים להתמודד.